* 本文轉自“非因生物"公眾號

腎細胞癌(RCC)具有血管侵襲的生物學傾向，4-15%的病例可形成腎靜脈或下腔靜脈(IVC)腫瘤血栓(TT)。基于免疫治療的聯(lián)合治療(IBCs)已成為治療晚期RCC的一線方法。在IBC治療的背景下，阿西替尼具有半衰期短、反應快、潛在免疫激活等特點，已成為新輔助治療中療效和實用性較理想的手術前用藥。NEOTAX是一項2期研究，旨在研究新輔助治療托帕里單抗聯(lián)合阿西替尼治療透明細胞腎細胞癌(ccRCC)和下腔靜脈腫瘤血栓(IVC-TT)的有效性和安全性。張旭院士、馬鑫教授及顧良友教授團隊牽頭開展了這項研究，并在Nature子刊“Signal Transduction and Targeted Therapy"中（IF：40.8）發(fā)表學術論著“Neoadjuvant toripalimab plus axitinib for clear cell renal cell carcinoma with inferior vena cava tumor thrombus: NEOTAX, a phase 2 study"。其中，研究利用Cell DIVE單細胞空間蛋白組學技術對19種marker進行9輪循環(huán)染色，將臨床研究結果進行了轉化研究及驗證，該部分實驗及分析由非因生物支持完成。

研究方案

研究結果

1.病例納入及數(shù)據(jù)

2020年3月至2023年10月期間，該單中心研究最終入組25例接受治療的患者(患者納入及干預過程如圖1)。其中，11例患者TT水平降低。新輔助治療可顯著降低腫瘤血栓患者的Mayo水平，其余14例患者血栓水平穩(wěn)定，Mayo水平均未升高。25例患者中有14例血栓水平穩(wěn)定，其中13例患者TT長度減少，TT長度的中位變化為- 2.3 cm(范圍:- 7.1至1.1 cm)。新輔助治療12周后，25例患者中有11例IVC-TT達到PR(腫瘤血栓長度縮小>30%)，但Mayo水平未升高

2. 術后并發(fā)癥及隨訪

21例患者成功行性腎切除術合并下腔靜脈血栓切除術。術后并發(fā)癥發(fā)生率為57.1%。最常見的輕微并發(fā)癥是一過性腎功能不全和術后需要輸血。3例患者出現(xiàn)嚴重并發(fā)癥。1例患者出現(xiàn)腎衰竭，需要透析。1例患者出現(xiàn)心肺驟停，需要進行心肺復蘇。1例患者因術中大出血而死于失血性休克和彌散性血管內凝血(V級，死亡率4.8%)。這些主要并發(fā)癥均不是由TKI治療或免疫治療引起的。盡管這些是IBC治療后常見的問題，但沒有報道傷口愈合的并發(fā)癥。在一些患者中觀察到腹腔內組織粘連，但并沒有導致手術復雜性顯著增加或需要實行開放手術。

整個隊列的中位隨訪時間為23.3個月，中位無進展生存期(PFS)為25.3個月。9例患者出現(xiàn)腫瘤進展(腫瘤復發(fā)、新轉移灶出現(xiàn)、原轉移灶進展)，其中7例術后進展。1年和2年的PFS分別為89.1%和54.8%(圖2d)。隨訪期間報告了2例死亡(8.0%)，其中1例患者出現(xiàn)疾病進展，1例患者死于(圖2c)。

3. 轉化研究

作者收集了18例患者術前原發(fā)腫瘤穿刺樣本，通過單細胞空間蛋白組學Cell DIVE技術對包括CD57、CD11b、CD68、PanCK、SMA、CD33、HLA-DR、CD14、CD163、CD45RO、CD68、PD-1、PD-L1、CD20、FoxP3、CD8、CD3、CD4、CD31在內的19種marker進行了循環(huán)染色。研究了潛在的分子生物標志物或免疫細胞亞群預測治療效果。研究根據(jù)TT響應對患者進行分層(響應組N，無響應組NR)，發(fā)現(xiàn)無響應組(NR)中細胞毒性T細胞(CD3+CD4?CD8+ CD45RO?)水平較高，其中主要源自PD-1陽性細胞(CD3+ PD1+CD4?CD8+CD45RO?)(圖3a, b, c)。此外，研究發(fā)現(xiàn)響應組具有較少的輔助T細胞(CD3+CD4+CD8?FOXP3?CD45RO?)，而其亞型：調節(jié)性T細胞(CD3+CD4+CD8? FOXP3+CD45RO?)作為另一個主要的免疫抑制T細胞并無顯著變化(圖3b)。以上結果說明雖然無響應組表現(xiàn)出較高的T細胞浸潤，但這些浸潤細胞可能主要是表達PD-1的免疫抑制性T細胞毒性細胞。這些表達PD-1的細胞可能與表達PD-L1的腫瘤細胞相互作用，最終導致對新輔助治療抵抗。因此，術前評估腫瘤穿刺標本中T細胞毒性PD-1/+細胞水平可以作為治療反應的預測指標。

在新輔助阿西替尼治療合并TT的RCC研究中，雖然沒有觀察到統(tǒng)計學差異，但作者發(fā)現(xiàn)了相似的T細胞趨勢。作者利用7例患者單細胞測序(scRNA-seq，其中4例來自NR組，3例來自R組)描述了腫瘤微環(huán)境的細胞分布。經(jīng)過嚴格的質量控制，共計獲得41973個細胞，并分為13種主要細胞類型(圖4a)。在NR組的非免疫細胞中，腫瘤細胞比例較高，內皮細胞和成纖維細胞比例較低(圖4b)，但免疫細胞無顯著差異(圖4c)，這表明T細胞亞群與新輔助治療的療效有潛在的聯(lián)系。對免疫細胞亞群進行進一步亞分類，結合多重免疫熒光的結果，發(fā)現(xiàn)T細胞的典型標記CD8T_01_GZMK_CXCR4子集發(fā)生了顯著變化，而其他子集保持不變(圖4d, e)。此前的研究報道了CD8+ GZMK+具有最高的細胞毒性評分和很低的衰竭評分，這與聯(lián)合治療的良好響應有關。

研究結論

這項臨床2期研究表明，托利哌單抗聯(lián)合阿西替尼有望降低IVC-TT的分期，并減少ccRCC和IVC-TT患者對廣泛手術治療的需求。此外，術前評估腫瘤穿刺標本中T細胞毒性PD-1/+細胞水平可以作為治療反應的預測指標，并且T細胞亞群可能與RCC-TT患者新輔助治療的有效性有關。